血液抹片及常見問題 Blood Smear and Common Problems (難度: ★★★)
血液抹片（Blood Smear）是一種常做的化驗，用於檢查血液中的細胞和細胞元素。這個過 程涉及將一小滴血液滴在玻璃片上，然後使用另一塊玻璃片將血液平均地擴展成一層薄薄的細 胞圖像。製作血液抹片的目的是為了在顯微鏡下觀察和評估血液細胞，包括紅血球（Red Blood Cells）、白血球（White Blood Cells）和血小板（Platelets）。這種技術可以提供 有關血液狀態和細胞形態的重要信息，有助於診斷和監測各種血液疾病，例如感染 （Infections）、貧血（Anaemia）等。
製作血液抹片的過程通常需要遵循特定的步驟和細節，以確保獲得高品質的抹片。這包括使用乾淨的玻璃片、控制血液量和均勻分佈的力度及角度，並進行適當的染色以提高細胞的可見性。製作質素好的血液抹片需要遵循一些關鍵步驟和技巧。
1. 確保工作台面乾淨，沒有灰塵或污垢。使用清潔的工具和玻璃片，以避免任何雜質影響抹片的質量。
2. 使用適當的血液採樣方法獲取新鮮的全血樣本。根據需要，可以將血液採集到 EDTA 中。
3. 取一塊乾淨且無灰塵的玻璃片作為抹片的基片。使用另一塊玻璃片作為擴展片（Spreader）。
4. 將擴展片平緩地放在血滴上，使血液在抹片基片上均勻分佈。以 45 度角，輕輕地將擴展片推開，使血液在基片上形成薄薄的一層。
5. 將製作好的血液抹片放在水平的表面上，讓其自然乾燥。一旦乾燥，可以使用染色劑進行染色並進行後續的顯微鏡檢查。
質素
一張質素好的血液抹片應該將血液細胞均勻分散在玻璃片上，並能清楚分辨三個結構：「Feathered edge（羽狀邊緣）」、「Monolayer（單層）」和「Base（基底）」；而不是有大片細胞聚集或過於稀疏的區域。這樣可以確保在顯微鏡下觀察時能夠看到足夠的細胞數量進行評估。
1. Feathered edge 是指位於玻璃片上的血滴的邊緣。這個區域的血液會被均勻地擴展開來，形成一個逐漸變薄的邊緣。這種羽狀邊緣的存在可以確保在顯微鏡下觀察時，細胞分佈較為均勻，而不會集中在玻璃片的中央區域。
2. Monolayer 指的是血液抹片上的一個區域，其中細胞以單層的方式均勻分佈。這個區域應該有足夠的細胞數量，而細胞之間並不重疊，在顯微鏡下可以清晰地觀察每個細胞的形態和特徵。Monolayer 的區域通常位於 Feathered edge 的近距離位置，並且是進行細胞計數和評估的主要區域。
3. Base 指的是血液抹片上的基底區域，相對於 Feathered edge 和 Monolayer 而言，細胞的分佈可能相對較密集，有時亦會有一些細胞重疊的情況。基底區域提供了更多的細胞供觀察，但在進行數量分析時，通常會專注於 Monolayer 區域。
這些結構在血液抹片的製作和觀察過程中具有重要意義，確保細胞的均勻分佈、形態完整以及提供足夠的可觀察區域。另外質素好的血液抹片應該能夠保持細胞形態的完整性。紅血球應該呈圓形，白血球和血小板應該有清晰的形態特徵。如果細胞變形、碎片或破裂，可能會影響對細胞的準確評估。一張質素好的血液抹片應該有均勻的染色效果，使細胞能夠清晰可見。染色應該能夠突顯細胞核和細胞結構，而不是出現斑駁或不均勻的染色。
常見的血液抹片問題
以下是血液抹片品質不佳時，顯微鏡下可能觀察到的假象。這些假象可能會干擾獸醫對血液細胞正確評估。因此，在製作血液抹片時，需要注意適當的抹片厚度、乾燥狀態以及避免施加過多壓力，以獲得高質量的血液抹片。
1. 抹片過厚或太濕：細胞會顯示出典型的形狀變化，例如凹陷，使對血液抹片的解讀更加困難。
2. 抹片過薄：紅血球形態出現問題，如細胞看起來像球狀。
3. 抹片過厚：紅血球形態出現問題，如細胞看起來像鱼形。
4. 紅血球區域不存在，無法評估紅血球形態。
5. 白血球不在羽狀邊緣處。
6. 細胞破裂，因為在製作抹片時施加了過多壓力。
小貼士：
1. 確保玻璃片和擴展片完全清潔，沒有任何灰塵和指紋。
2. 血滴的大小非常重要，如果血滴太少，抹片會過短，導致區域不足以進行評估；如果血滴太大，抹片就會延伸到玻璃片的末端，使其讀取性大大降低。
3. 對於「較稀」的血液，例如貧血患者，你需要使用較大的血滴，並將擴展片保持在較高的角度（45-55º），這樣可以吸取更多的血液並在抹片中放置更多的細胞，以補償血液稀釋。
4. 對於「較濃」的血液，例如脫水患者，使用較小的血滴，並將抹片器保持在較低的角度（30-40º），這樣可以吸取較少的血液並在抹片中放置較少的細胞，以補償血液濃縮。
5. 練習使用平穩均勻的壓力推動擴展片，否則抹片的厚度會不均勻，降低其對解讀的有用性。
綜合考慮以上因素，一張質素好的血液抹片應該具備細胞均勻分散、細胞形態完整、染色均勻、無空氣泡和雜質等特點。專業的實驗室技師或醫學專業人員在評估血液抹片時能夠辨識這些特徵並作出準確的評估。